嵌合性启动子HRE.CArG的构建及对肝癌细胞乏氧和射线应答的调控

实体瘤中乏氧区的存在是影响放疗效果最主要的因素之一[1].在一个基因启动子内利用乏氧和射线应答元件联合,限制治疗基因仅在乏氧和/或受照组织激活,可提高治疗比率.该文研究目的是构建包含HREs和CArG元件的乏氧-辐射嵌合性基因启动子,并观察乏氧及照射时该启动子诱导增强的绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)在BEL7402肝癌细胞中的表达变化.     

基于不同体位定位CT探讨不同勾画者勾画保乳术后部分乳腺外照射靶区差异

目的 比较基于不同体位定位CT下不同勾画者勾画保乳术后部分乳腺外照射(EB-PBI)靶区差异。方法 2016-2017年间27例保乳术后拟行EB-PBI的患者在自由呼吸状态下序贯完成俯卧位及仰卧位模拟定位3DCT扫描。5位勾画者分别在两种不同体位CT图像上基于术腔金属夹完成瘤床(TB) 靶区勾画和临床靶区(CTV) 的构建。比较两种体位不同勾画者间的靶体积、变异系数(COV)、匹配指数(MD)差异。结果 无论仰卧位还是俯卧位时,不同勾画者所勾画TB、CTV均不同(P<0.001、P=0.001、P<0.001、P=0.001)。俯卧位时不同勾画者CTV交集比仰卧位大5.79cm³(P=0.011)。仰卧位时5位勾画者的COVCTV显著大于俯卧位(P=0.014)。仰卧位时5位勾画者的MDTBTB及MDTBCTV均显著劣于俯卧位(P<0.001、P=0.001)。结论 与仰卧位相比,基于俯卧位构建EB-PBI靶区可显著减少不同勾画者间差异,提高勾画者间的一致性。因此,在自由呼吸状态下基于俯卧位施行EB-PBI更为合理。     

网络药理学与分子对接技术指导下土大黄苷对慢性粒细胞白血病作用机制研究

目的 近年来,蛋白质相互作用网络及分子对接技术成为中药现代化研究领域十分活跃的一部分,逐渐成为链接中药应用与现代化的重要纽带.本研究基于分子对接技术与网络药理学分析,探讨中药大黄活性成分土大黄苷与慢性粒细胞白血病(chronic myelocytic leukemia,CML)相关基因之间的相互作用,寻求土大黄苷作用与CML的可能机制.方法 前期研究中构建了CML蛋白质相互作用网络,并筛选了CML关键靶点蛋白,作为本研究的受体;通过软件Chemoffice 8.0构建土大黄苷的分子结构,导入SYBYL软件中,进行一系列数据处理,作为本研究的配体.利用SYBYL8.1软件的Surflex-Dock模块进行分子对接,用配体-受体亲和力的一致性评分函数进行打分,并对氢键及其结合部位进行观察、分析.进一步对分子对接结果进行文献验证.结果 得到土大黄苷与CML19个相关基因之间的分子对接评分及氢键数,其中与JUN(2G01)受体对接得分及氢键数是最高的,说明土大黄苷与JUN(2G01)结合最好,可以推断JUN(2G01)是土大黄苷优先选择的作用受体.其次,得分较高的还有SRC (SRC)、JAK2 (5AEP)、MAPK14(2YIX)、FRAP1(3OAW)、MAPK8(3PZE)和PARP1(1U5Y)等.结论 大黄活性成分土大黄苷对CML的作用机制是多靶点、多途径相互作用的,其作用受体可能与JUN、SRC、JAK2、MAPK14、FRAP1、MAPK8和PARP1等基因相关.     

模拟IMRT模式下相对剂量率变化对CNE-2细胞周期及Cyclin D1、Cyclin B1蛋白表达的影响

目的探讨模拟调强放射治疗（intensity-modulated radiation therapy IMRT）对人鼻咽低分化鳞癌细胞株（CNE-2）细胞周期及Cyclin D1、Cyclin B1蛋白水平的影响。方法选取CNE-2为实验对象,分为空白对照组、急速照射组（acute radiation AR）及模拟IMRT（simulational intensity-modulated radiation SIMR）组,后2组分别给予6MV-X线2、4、6、8 Gy 4个剂量点的照射。急速照射组完成时间1-3分钟;模拟IMRT组：各个剂量点分别等分分割5次,每次间隔8-8.5分钟,总时间35分钟照射完成。应用流式细胞术（FCM）分析细胞周期再分布的差异;应用Western blotting检测细胞周期相关因子Cyclin B1、Cyclin D1的蛋白水平。结果在相同剂量点,模拟IMRT组G2期细胞比例低于急速照射组,G2期细胞比例随照射剂量的增加而逐渐增加。急速照射与模拟IMRT组不同剂量点之间以及在相同剂量点比较,Cyclin D1的蛋白表达差异均无统计学意义（P值均〉0.05）;Cyclin B1的蛋白表达差异均有统计学意义（P值均〈0.05）,且随照射剂量的增加而下降,模拟IMRT组Cyclin B1的表达高于急速照射组。结论模拟IMRT照射时间延长,对G2期阻滞作用下降,细胞周期素Cyclin B1的表达相对升高。     

表没食子儿茶素没食子酸酯对放射性食管炎动物模型的作用研究

目的 研究表没食子儿茶素没食子酸酯（epigallocatechin-3-gallate,EGCG）对放射性食管炎模型新西兰兔的影响。方法 取雄性新西兰兔30只,用随机数表法分为3组,每组10只,分别为空白组、生理盐水组、EGCG组。EGCG组、生理盐水组给予6 MV X射线照射造模,照射结束后分别给予EGCG和生理盐水治疗,每天3次,连续5 d。观察食管组织病理变化并评分,用酶联免疫吸附法测定血清白细胞介素1β（IL-1β）、白细胞介素6（IL-6）、转化生长因子β（TGF-β）及肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平,用免疫组织化学检测食管组织67LR的表达,应用Western blot检测67LR水平。结果 给药后,空白组、生理盐水组、EGCG组食管组织病理变化程度评分分别为0、3.90±1.10、2.80±0.92。3组血清IL-1β、IL-6、TGF-β及TNF-α水平的差异随着时间的延长显著增高（F=23.66~236.32,P<0.05）。3组食管组织67LR含量差异有统计学意义（F=585.38,P<0.05）。结论 EGCG能够减轻放射性食管炎的发生及严重程度,其作用可能与67LR表达有关。     

非小细胞肺癌3D-CRT与IMRT立体定向放疗剂量学比较

目的:研究三维适形(3D-CRT)和逆向调强(IMRT)两种计划方式在进行早期非小细胞肺癌(NSCLC)立体定向放射治疗(SBRT)的剂量学差异。方法:选取接受放射治疗的早期NSCLC患者12例,分别采用3D-CRT和IMRT技术设计SBRT治疗计划。比较两种计划方式下PTV的相关剂量学参数(CI、HI、D1%、D99%),肺、胸壁、心脏及脊髓的剂量学参数(Vx、Dmean、Dmax),以及加速器的机器跳数、治疗时间等差异。结果:在PTV相关参数比较中,3D-CRT计划的CI、HI以及D1%均差于IMRT,差异有统计学意义,P<0.05;但是两者的D99%差异无统计学意义,P>0.05。在危及器官受量的比较中,3D-CRT与IMRT计划的患侧肺V5～V40、健侧肺V5～V15、双侧肺V5～V40、胸壁V5～V40、Dmean、心脏V20～V40、Dmean及脊髓Dmax的差异均无统计学意义,P>0.05。3D-CRT计划的机器跳数及治疗时间较IMRT计划分别减少了53%和78%,P<0.05。在绝对剂量体积比较中,3D-CRT的V60～V75及V45～V60均大于IMRT,V20～V45小于IMRT,差异均无统计学意义,P>0.05。结论:IMRT计划在早期NSCLC行SBRT治疗中不具有明显的剂量学优势。考虑到IMRT实施过程的复杂性和不确定性,早期NSCLC行SBRT治疗时3D-CRT可作为首选。     

三维适形放射治疗加常规放射治疗鼻咽癌的临床研究

目的 探讨三维适形放疗治疗加常规放射治疗鼻咽癌的疗效与优势。方法 初次治疗78例鼻咽癌患者,分两阶段对原发灶及颈部放射治疗。第一阶段针对鼻咽部病灶以及颈部转移病灶采用三维适形放射治疗,单次剂量2~5Gy,每周5次,总剂量30Gy。第二阶段T1N0或部分T2N0鼻咽癌患者行两耳前野DT55Gy+前后颈切野照射DT50Gy,颈部中间加一个3cm挡块。颈淋巴结转移患者行面颈联合两侧野照射DT55Gy(40Gy后缩野避开脊髓和脑干)+中下颈前后切野DT55Gy,均为常规分割放疗,射野上界保持与主野下界衔接。结果 治疗结束后3个月局部肿瘤(原发灶和颈部淋巴结)完全缓解率、部分缓解率、无变化率以及进展率分别为38.5%、55.1%、5.1%、1.3%,总有效率(CR+PR)为93.6%。肿瘤1、2、3、5年局控率分别为92.3%、88.5%、78.2%、70.5%。1、2、3、5年生存率分别为96.2%、89.7%、83.3%、71.8%。出现的早期放射反应都能耐受,在随访过程中未观察到明显的张口困难或后组颅神经损伤。结论 鼻咽癌三维适形放射治疗加常规放射治疗的近远期疗效肯定。     

3D-CRT联合主动脉呼吸控制主体定向放射治疗剂量学分析

目的:探讨高剂量率三维适形放疗(three-dimensional conformal radiation therapy,3D-CRT)联合主动呼吸控制技术(active breathing control,ABC)进行早期非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)立体定向放射治疗(ste-reotactic body radiation therapy,SBRT)的剂量学特点。方法:选取接受放射治疗的早期NSCLC患者8例,分别在ABC辅助下适度深吸气末屏气(moderate deep inspiration breath-hold,mDIBH,触发阈值设定为峰值的80%)和自由呼吸(free breathing,FB)状态下行模拟定位CT扫描,分别在2套CT图像上采用高剂量率(剂量率为1 000 Mu/min)的3D-CRT设计SBRT计划。比较2种呼吸状态下大体肿瘤体积(gross tumor volume,GTV)、计划靶体积(planning targetvolume,PTV)、双肺的体积、2种计划方式下PTV的最大剂量(D1%)和最小剂量(D99%)、靶区剂量分布的均匀指数(HI)和适形指数(CI)、正常组织的相关体积-剂量(Vx、Dmean、Dmax)及机器跳数(MU)的差异。结果:PTV体积由FB下平均158.04cm3减少到了mDIBH下的76.90cm3,减少51.34%,P=0.006;GTV FB体积较GTV mDIBH平均减少了约3cm3,差异无统计学意义,P=0.658;mDIBH状态下患侧肺、健侧肺和双肺平均体积分别由FB状态下的1 978.77、1 762.55和3 745.26cm3增加到了2 910.88、2 671.13和5 615.85cm3,分别增加了32.02%、35.36%和33.31%,P值均<0.05。FB及mDIBH状态下的靶区剂量的CI、HI、D1%和D99%均基本相当,P>0.05;mDIBH下3D-CRT计划中患侧肺V5～V40、双侧肺V5～V40及Dmean、胸壁V5～V40及Dmean、脊髓Dmax、绝对剂量体积V60-50、V50-40均小于FB状态,P<0.05;mDIBH下的健侧肺V5～V15、心脏V20～V40、Dmean以及绝对剂量体积V40-30、V30-20较FB略有降低,绝对剂量体积V20-10、V10～V5略有增大,P>0.05;3D-CRT mDIBH的MU及照射时间与3D-CRT FB基本相当,P>0.05。结论:高剂量率的3D-CRT联合ABC技术在早期NSCLC SBRT中可在不影响靶区剂量分布的同时,更好的降低肺组织、胸壁受照剂量。     

PET/CT显像在构建肿瘤放疗生物靶区中的作用

在调强放疗的常规分割研究中,肿瘤靶区内放射敏感性不同的区域所需要的放疗剂量也应该不尽相同.对于放疗中肿瘤局部或全部达到CR的靶区是否有残留的肿瘤细胞是实施放疗补量的重要前提.这使以CT解剖影像学为基础的放疗靶区研究成为瓶颈.对此,通过PET/CT功能性成像研究实施的、以反映与肿瘤细胞放射敏感性和细胞增殖有关的细胞代谢、乏氧和细胞周期各时相DNA动态变化的生物靶区构建研究,将成为重要的研究领域.     

HIF-1α基因沉默对A549肺癌细胞放射敏感性的影响

目的 探讨RNA干扰技术致HIF-1α基因沉默对裸鼠肺癌种植瘤放射敏感性的影响。方法 采用以慢病毒为载体的RNA干扰技术获得HIF-1α基因沉默的A549肺癌细胞株,用Western blot方法检测HIF-1α蛋白的表达。将A549/HIF-1α(-)细胞及A549细胞接种于4～6周BALB/C雄性裸小鼠,观察肿瘤生长情况。肿瘤体积达200～350 mm³时分别给予局部单次5、10、15和20 Gy X射线照射,观察对照组和照射组肿瘤体积和肿瘤生长延缓时间。结果 在常氧和乏氧状态下,A549/HIF-1α(-)细胞HIF-1α蛋白表达水平均显著下降,A549/HIF-1α(-)组裸鼠成瘤潜伏期较长,肿瘤生长慢于A549组(P<0.05),X射线照射对两种裸鼠种植瘤的生长均有抑制作用,但A549/HIF-1α(-)组肿瘤生长延缓显著。结论 RNA干扰技术能稳定阻断人肺腺癌A549细胞HIF-1α表达,HIF-1α基因沉默的肿瘤细胞对X射线照射更敏感。